液相色譜常見符號(hào)與術(shù)語歸納 液相色譜使用方法
時(shí)間:2023-01-07 09:32:02 作者:河北航信儀器 點(diǎn)擊:
【***** 使用手冊(cè)】在液相色譜的相關(guān)運(yùn)用和了解過程中,難免會(huì)出現(xiàn)一些不容易看懂的縮寫字符,如果不能了解這些字符所對(duì)應(yīng)的意義和背后的含義,那么便不能更加有效率的使用和學(xué)習(xí)液相色譜儀的相關(guān)知識(shí),下面便是總結(jié)的一些在液相色譜儀中常用的符號(hào)和術(shù)語(以字母順序排列): ACN 乙腈 Acetonitrile AUFS滿量程的吸光度單位Absorbance units, full scale As 峰不對(duì)稱因子 B 二元流動(dòng)相中的強(qiáng)溶劑;例如:反相HPLC的甲醇/水混合液中的甲醇 BSA 牛血清白蛋白(一種蛋白質(zhì)) Bovine serum albumin CAF 咖啡因(中性溶質(zhì)) Caffeine CRF 色譜響應(yīng)因子 Chromatographic response function;色譜圖總分離度的定量指標(biāo) dc 色譜柱內(nèi)徑(cm) DMOA 二甲基辛胺 Dimethyloctylamine DNB 2,4-二硝基甲酰(基) 2,4-Dinitrobenzoyl dp 色譜柱填料的粒度(cm) DRYLAB 液相資源公司(LC Resources INC.)的計(jì)算機(jī)模擬軟件。DRYLAB I用于等度預(yù)測(cè),DRYLAB G用于梯度預(yù)測(cè) F 流動(dòng)相的流速(ml/min) FC-113 1,1,2-三氟-1,2,2-三氯乙烷 GPC 凝膠滲透色譜法 Gel-permeation chromatography HA 酸性溶質(zhì),能電離出A- Hex 己烷 Hexane Hr 二相鄰譜帶之間的谷高 HVA 高香草酸 Homovanillic acid h’ 峰高 h1,h2 相鄰譜峰1和譜峰2的峰高 IEC 離子交換色譜法 Ion-exchange chromatography IP 離子對(duì) Ion-pair IPC 離子對(duì)色譜法 Ion-pair chromatography J 色譜峰強(qiáng)度參數(shù) K’所給譜峰的容量因子,k’=(tR-t0)/t0=tR’/t0,tR=t0(1+k’) k 梯度洗脫過程中,某溶質(zhì)的k’的平均值或有效值 kw 以水做流動(dòng)相k’的外推值 k1,k2 相鄰譜峰1和譜峰2的容量因子 L 色譜柱長(zhǎng)度(cm) Lc 檢測(cè)器流動(dòng)池光路的長(zhǎng)度(cm) M 溶質(zhì)的分子量 MC 二氯甲烷 Methylene chloride MDST 混合設(shè)計(jì)統(tǒng)計(jì)技術(shù) Mixture-design statistical technique;一種優(yōu)化流動(dòng)相的軟件 MeOH 甲醇 Methanol MTBE 甲基叔丁醚 Methyl-t-butyl ether MW 溶質(zhì)的分子量 N 色譜柱塔板數(shù) NAPA N-乙酰普魯卡因胺 N-Acetylprocainamide(堿性溶質(zhì)) N0 檢測(cè)器的基線噪音 ODS 十八烷基硅烷 Octadecylsilyl P 色譜柱的壓力降[通常以巴(bar)表示,也用psi;另外,也用作柱極性參數(shù) PA 普魯卡因胺 Procainamide(堿性物質(zhì)) PAH 聚芳香烴 Polyaromatic Hydrocarbon PESOS 優(yōu)化流動(dòng)相的計(jì)算機(jī)軟件(美國(guó)Perkin-Elmer產(chǎn)品) pKa 溶質(zhì)酸性常數(shù)的負(fù)對(duì)數(shù);當(dāng)pH=pKa時(shí),溶質(zhì)中有一半是電離的 Rk 保留值范圍,Rk=(末譜峰k’)/(初譜峰k’) RRM 相對(duì)分離度圖(通常N=10000) Rs 相鄰二譜峰的分離度 S 當(dāng)流動(dòng)相中的%B改變時(shí),測(cè)量溶質(zhì)保留值的變化速率的參數(shù) SAL 水楊酸 Salicylic Acid SEC 尺寸排阻色譜法 Size-exclusion chromatography S/N 信噪比 Signal to noise ratio t 分離時(shí)間(min)(樣品進(jìn)樣時(shí)t=0) tp 梯度系統(tǒng)的滯后時(shí)間(min) TBA 四丁基銨離子 Tetrabutylammonium ion TEA 三乙胺 Triethylamine THF 四氫呋喃 Tetrahydrofuran tk 在用于校正等度洗脫溶劑強(qiáng)度的流動(dòng)相離開梯度混合器時(shí),梯度洗脫的時(shí)間TLC 薄層色譜法 Thin-layer chromatography TMA 四甲基銨 Tetramethylammonium(鹽) TMS 三甲基硅烷 Trimethylsilyl tO 色譜柱的死時(shí)間(min) tR 溶質(zhì)的保留時(shí)間(min) tG 梯度時(shí)間(min),即梯度開始至結(jié)束的時(shí)間 t1,t2 相鄰譜峰1和譜峰2的保留時(shí)間(min ti 色譜圖中峰的保留時(shí)間(min) tf 色譜圖中末峰的保留時(shí)間(min) △tg tf-ti tx (tf-ti)/2 UV 紫外光 Vm 色譜柱的死體積(mL),Vm=t0F VMA 香草扁桃酸 Vanillymandelic acid wm 化合物的進(jìn)樣量 w1,w2 相鄰譜峰1和譜峰2于半峰高處(W1/2)的寬度(min) W1,W2 相鄰譜峰1和譜峰2的基線寬度(min) W1/2 半峰高處的譜帶寬度 以上是常見的在液相色譜儀中出現(xiàn)的符號(hào)和術(shù)語歸納,受限于時(shí)間和精力,本文歸納僅為不**匯總,疏漏之處,歡迎補(bǔ)充。
液相色譜流動(dòng)相說明
流動(dòng)相相當(dāng)于液相的血液,可以想象對(duì)液相的重要程度。那么流動(dòng)相都需要注意什么呢? 01、過濾溶劑 溶劑在使用前**要用0.5μm的過濾器過濾,如果使用固體化學(xué)試劑(緩沖鹽)配制流動(dòng)相,過濾特別重要,不能讓固體微粒污染泵,阻塞進(jìn)樣器和柱頭過濾片。本實(shí)驗(yàn)室有水溶性和脂溶性兩種過濾膜供選擇(反光面朝上),過濾水溶性流動(dòng)相時(shí)(如甲醇/水),先用1~2mL甲醇潤(rùn)濕過濾膜,有助于快速抽濾?! ?2、保持儲(chǔ)液瓶的清潔 用普通溶劑瓶作流動(dòng)相儲(chǔ)液器應(yīng)不定期廢棄瓶子,***后一次應(yīng)用HPLC級(jí)的水或溶劑清洗,不能在清洗過程中留下污跡?! ?3、保證溶劑的質(zhì)量 **要用HPLC級(jí)的溶劑,水也應(yīng)達(dá)到HPLC級(jí),同樣也要使用高純度的緩沖鹽?! ∫恍┮蛄鲃?dòng)相引起的常見問題 01、流動(dòng)相脫氣不充分 流動(dòng)相受熱,或者流動(dòng)相不同組分混合時(shí)會(huì)有氣體產(chǎn)生,氣泡進(jìn)入泵內(nèi)引起壓力波動(dòng),增加噪音,色譜圖上出現(xiàn)毛刺??稍囉孟铝蟹椒ń鉀Q問題:流動(dòng)相再脫氣;采用更有效的脫氣方法或兩種方法配合使用;改系統(tǒng)內(nèi)混合為系統(tǒng)外預(yù)混合。 02、流動(dòng)相供給不暢 流動(dòng)相用完,管道中吸入氣體引起泵壓力不穩(wěn)。應(yīng)經(jīng)常觀察儲(chǔ)液器中流動(dòng)相的量,加足流動(dòng)相保證所有的樣品分析完畢。輸液管道上裝沉子沉至瓶底,儲(chǔ)液器蓋上留一小孔正好夾住進(jìn)液管,使其不能上下移動(dòng)。 過濾器阻塞引起管道和泵腔空化,壓力不穩(wěn)。過濾器被微粒所阻塞或長(zhǎng)霉,去掉過濾器后如果系統(tǒng)運(yùn)轉(zhuǎn)正常,說明已找出問題,換上新的過濾器則可。有時(shí)候換上新的過濾器仍然不暢,那就需要查查流動(dòng)相的制備過程,或者換大孔徑的過濾器。不管如何,流動(dòng)相都需要重新過濾?! ×魉龠^高、阻力大,造成空化現(xiàn)象,這是由于過濾器孔徑、管道內(nèi)徑、流速和溶劑黏度等引起的。如果流速大于10mL/min,常會(huì)出現(xiàn)這種現(xiàn)象?! ∈褂孟铝蟹椒ń鉀Q: (1)使用低流速; (2)換大孔徑的過濾器; (3)增加進(jìn)液管道內(nèi)徑; (4)抬高或加壓儲(chǔ)液器; (5)不用過濾器,但流動(dòng)相**要先過濾; (6)儲(chǔ)液器蓋子太緊,在儲(chǔ)液器內(nèi)形成真空,打出的流動(dòng)相不連續(xù)。應(yīng)松開蓋子或留有1mm的縫隙; (7)進(jìn)液管道阻塞或彎曲使泵抽不到液,注意調(diào)整進(jìn)液管道或更換新的。其它問題包括滲漏或接頭松動(dòng)、泵部件損壞等,都能引起供液不正常?! ?3、流動(dòng)相和儲(chǔ)液器被污染 由于污染,噪音越來越大,檢測(cè)器基線上升。污染物可能被泵以穩(wěn)定的濃度打入系統(tǒng),而再以穩(wěn)定的濃度流出來,所以在色譜圖中不出多余的峰。用梯度洗脫時(shí)弱流動(dòng)相可以使污染物聚在柱頂,流動(dòng)相強(qiáng)度增加后污染物可能被洗脫出來一個(gè)大的偽峰。有時(shí)基線噪音突然增大或突然提高,都是因?yàn)榉磸?fù)加進(jìn)新的流動(dòng)相或系統(tǒng)用得太久(通宵)所造成的。新加進(jìn)的流動(dòng)相有污染物或者流動(dòng)相長(zhǎng)霉,繁殖了**?! ∨K的儲(chǔ)液器會(huì)污染清潔的流動(dòng)相。每種流動(dòng)相備有專用的儲(chǔ)液器,或者定期報(bào)廢儲(chǔ)液器?! ×鲃?dòng)相污染來自這幾個(gè)方面 04、試劑質(zhì)量不高,玻璃器皿不合格; 微生物的影響; 配制流動(dòng)相時(shí)操作不當(dāng)?shù)? 因此要求高純度化學(xué)試劑和HPLC級(jí)溶劑; 玻璃器皿按規(guī)定清洗干凈; 為防止微生物生長(zhǎng),每天要用甲醇清洗系統(tǒng); 懷疑系統(tǒng)內(nèi)生長(zhǎng)了微生物,可用稀硝酸沖洗即可(注意不要損壞柱和管道系統(tǒng)); 真空脫氣時(shí)防止泵油帶入流動(dòng)相; 用清潔的惰性塞子、攪棒、過濾器和玻璃器皿配制流動(dòng)相; 已經(jīng)污染的流動(dòng)相**要廢棄掉。