通用型反相色譜柱在使用前,進行柱的性能測試,并將結(jié)果保存起來,作為今后評價柱性能變化的參考。但要留意: 液相色譜柱柱性能可能由于所使用的樣品、活動相、柱溫等條件的差異而有所不同;另外,在做柱性能測試時是按照色譜柱出廠報告中的條件進行(出廠測試所使用的條件是zui佳條件),只有這樣,測得的結(jié)果才有可比性。
樣品的前處理:
a、使用活動相溶解樣品。
b、使用予處理柱除往樣品中的強極性或與柱填料產(chǎn)生不可逆吸附的雜質(zhì)。
c、使用0.45μm的過濾膜過濾除往微粒雜質(zhì)。
通用型反相色譜柱的保養(yǎng)
通用型反相色譜柱在使用前,進行柱的性能測試,并將結(jié)果保存起來,作為評價柱性能變化的參考。
但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同;另外,在做柱性能測試時是按照色譜柱出廠報告中的條件進行(出廠測試所使用的條件是zui佳條件),只有這樣,測得的結(jié)果才有可比性。在對色譜柱使用前進行測試以后,要根據(jù)不同的情況對色譜柱進行保養(yǎng):
①通用型反相色譜柱每天實驗后的保養(yǎng):使用緩沖液或含鹽的流動相,實驗完成后應(yīng)用10%的甲醇/水沖洗30分鐘,洗掉色譜柱中的鹽,再用甲醇沖洗30分鐘。
注意:不能用純水沖洗柱子,應(yīng)該在水中加入10%的甲醇,防止將填料沖塌陷。
?、陂L期保存色譜柱:如色譜柱要長時間保存,必須存于合適的溶劑下。對于反相柱可以儲存于純甲醇或乙腈中,正相柱可以儲存于嚴格脫水后的純正己烷中,離子交換柱可以儲存于水(含防腐劑疊氮化鈉或柳硫汞)中,并將購買新色譜柱時附送的堵頭堵上。儲存的溫度是室溫。
色譜柱種類介紹色譜柱是色譜儀器中重要組成部分之一,它是分離不可缺少的一部分。因此不同的樣品分類,用到不同的色譜柱。
色譜柱可簡單分為以下幾類:
a、根據(jù)分離方式分為:
(1)正相色譜柱:SIL--磷脂、NH--糖、維生素E,CN--甾類**。
(2)反相色譜柱:ODS(C18)、(C8CNTMSPheny1)低分子量化合物。
(3)離子交換色譜柱等。
b、根據(jù)所有的擔體材料分為三種:
(1)硅膠型:機械強度高,易制成小顆粒,理論塔板數(shù)高。
(2)聚合物型:在廣泛的PH值范圍內(nèi)穩(wěn)定。
(3)羥基磷灰石型:對蛋白質(zhì)等生物高分子樣品有特殊的選擇性。