【***** 使用手冊(cè)】色譜法，又稱“色層法”、“層析法”，早誕生于俄國(guó)植物學(xué)家——茨維特之手，后在此基礎(chǔ)上又相繼發(fā)展出薄層色譜法、氣相色譜法、液相色譜法以及紙色譜法。目前，常見(jiàn)的液相色譜儀生產(chǎn)廠家有沃特世、安捷倫、島津、依利特、上海分析儀器廠、北京分析儀器廠等。　　在液相色譜儀開(kāi)機(jī)前，我們首先應(yīng)當(dāng)做好準(zhǔn)備工作，主要有配置試驗(yàn)要求的流動(dòng)相、安裝試驗(yàn)用的色譜、將流動(dòng)相過(guò)濾脫氣三點(diǎn)。流動(dòng)相的過(guò)濾，主要是為了除去流動(dòng)相中的微粒物質(zhì)，所應(yīng)用到的濾膜可分脂溶性濾膜(有機(jī)濾膜)、水溶性濾膜與通用型濾膜?！　《鲃?dòng)相的脫氣，則是為了流動(dòng)相防止在泵、流路、檢測(cè)器等儀器組成部分中產(chǎn)生氣泡，從而造成泵的不穩(wěn)定，并增加檢測(cè)器的噪音。據(jù)了解，氦氣脫氣、真空脫氣、超聲脫氣、加熱脫氣均可運(yùn)用于液相色譜儀的流動(dòng)相脫氣。脫氣的操作，需要以流動(dòng)相中的混合物濃度不發(fā)生變化為主要原則?！　×硗?，色譜柱的安裝調(diào)試，還涉及反相色譜柱與正相色譜柱兩種。反向色譜柱多以硅膠為基質(zhì)，常以硅膠健合C18、C8為填料。值得一提的是，液相色譜儀還應(yīng)當(dāng)采用穩(wěn)定性較高的反相色譜柱。因?yàn)?，這種色譜柱還能夠承受酸與堿的作用。同時(shí)，因存在著色譜儀遭受腐蝕的可能性，操作人員還應(yīng)當(dāng)勤勞更換每次試驗(yàn)用水，不使用鹵化物。后，為控制樣品在分析過(guò)程中的解離，操作人員還需注意反向色譜柱使用時(shí)的pH值，過(guò)高的pH值會(huì)溶解硅膠，過(guò)低的pH則會(huì)造成烷基的脫落?！　〕鲜鰩讉€(gè)檢測(cè)的開(kāi)機(jī)準(zhǔn)備工作以外，儀器設(shè)備本身的質(zhì)量、色譜條件、操作人員技術(shù)熟練程度、儀器安裝環(huán)境，都是影響著液相色譜儀發(fā)揮作用的關(guān)鍵因素。不僅如此，儀器使用者還應(yīng)當(dāng)每三個(gè)月，就對(duì)液相色譜儀的清洗溶劑過(guò)濾器及溶劑瓶進(jìn)行清洗，以此來(lái)保證儀器長(zhǎng)時(shí)間、率的使用。 如何排除液相色譜儀高壓泵中的氣泡

　　在進(jìn)行液相色譜儀分析實(shí)驗(yàn)時(shí)，流動(dòng)相再進(jìn)入儀器之前，必須使用超聲波清洗機(jī)進(jìn)行簡(jiǎn)單的除氣泡處理，以防對(duì)泵造成損害，對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成干擾。若在檢測(cè)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)液相色譜儀恒流泵里有氣泡，須及時(shí)進(jìn)行排除，排除高壓液相色譜儀泵中氣泡的方法如下。

　　1、首先，檢查流動(dòng)相儲(chǔ)液瓶中的溶劑過(guò)濾頭是否阻塞。具體做法：將輸入三通器上的溶劑塑料連接管的卸下，將流動(dòng)相儲(chǔ)液瓶置于高位，利用壓差使溶液流出。如果溶劑流的很順暢，說(shuō)明溶劑過(guò)濾頭是好的。如果是一滴一滴的流出，則說(shuō)明過(guò)濾頭阻塞，需要超聲清洗，復(fù)原。

　　2、用堵頭將儀器的高壓液流輸出口封住將色譜柱連在管路上、，可避免在抽液時(shí)將空氣抽入管路內(nèi)。將儀器所配的注射器及塑料連接管插到放空閥的導(dǎo)管上，逆時(shí)針旋開(kāi)放空閥旋鈕，抽液5-10mL，將泵的流速設(shè)定在每分鐘一毫升的流速。啟動(dòng)泵，觀察塑料連接管的流動(dòng)溶液是否還有氣泡。如沒(méi)有氣泡說(shuō)明從過(guò)濾頭到放空閥這一段已將氣泡排除。

　　3、將泵關(guān)閉，將堵頭從儀器的高壓液流輸出口去掉將色譜柱從管路上卸掉、使輸出口放空。順時(shí)針關(guān)閉放空閥旋鈕，將泵的流速設(shè)定在3-5mL的流速，將泵內(nèi)的阻尼器和壓力傳感器的氣泡趕出，流出溶液10-15mL將泵關(guān)閉。連接上色譜柱，將流速設(shè)定在每分鐘一毫升，啟動(dòng)泵，觀察壓力及壓力脈動(dòng)。

　　4、用水和異丙醇甲醇、交替沖洗泵的內(nèi)腔，使吸附在內(nèi)墻壁上的氣泡趕出。

　　5、應(yīng)用快速降壓法趕出氣泡：用小堵頭將泵的流動(dòng)相輸出口堵上，將流速設(shè)定在1毫升/分，將柱前壓力升至20Mpa左右，將排空閥快速打開(kāi)，重復(fù)2~3即可。