當開始進行樣品測試時,需注意選擇正確的工作參數(shù)和條件。
激光器的功率要隨不同測試樣品而改變,對固體或液體等不易分解的可用較強功率激發(fā),生物樣品等應選較低功率激發(fā)。
積分時間可在開始時選擇10s一次,正式測量時可根據(jù)信噪比的情況而定,信噪比高的積分時間可稍短,反之可采用較長時間積分。
狹縫寬度的選擇可根據(jù)所測光譜是否需要高分辨或高共焦模式來決定大小。
為保證給出的拉曼光譜圖,可在光路調(diào)校好之后用快速掃描模式進行一次預掃描;
然后根據(jù)測定要求和預掃描情況設(shè)定掃描范圍、步長、積分時間、狹縫寬度、激發(fā)功率和掃描次數(shù)等進行正式測定。
若樣品易于光解,除降低激光功率外,還可更換測試點實施分段掃描。
完成測試后,應在顯微鏡下檢查樣品足否已經(jīng)損傷(光解、熱解、脫落或變性等)。
拉曼光譜儀在***研究中的應用包括:
1、中藥的優(yōu)化
對于***及中成藥和**這一復雜的混合物體系,不需**成分分離提取直接與**和細胞作用;
利用拉曼光譜無損采集**和細胞的光譜圖,觀察**和細胞的損傷程度,研究其藥理作用,并進行中藥材、中成藥和方劑的優(yōu)化研究。
2、***化學成分分析
薄層色譜(TLC)能對***進行有效分離但無法獲得各組份化合物的結(jié)構(gòu)信息;
而表面增強拉曼光譜(SERS)具有峰形窄、靈敏度高、選擇性好的優(yōu)點,可對***化學成分進行高靈敏度的檢測。
利用TLC的分離技術(shù)和SERS的指紋性鑒定結(jié)合,是一種在TLC原位分析***成分的新方法。
3、***的無損鑒別
由于拉曼光譜分析,無需破壞樣品,因此能對***樣品進行無損鑒別,這對名貴中***的研究特別重要。
4、***的穩(wěn)定性研究
利用拉曼光譜儀動態(tài)跟蹤***的變質(zhì)過程,這對***的穩(wěn)定性預測、監(jiān)控藥材的質(zhì)量具有直接的指導作用。
拉曼光譜儀使用的注意事項
(1)激發(fā)光使用好預熱一下,拉曼光譜儀的話還要注意拉曼探頭端面的清潔,如果窗口片臟掉的話會影響測試效果了。
(2)在打開拉曼光譜儀之前,先把拉曼探頭的蓋子打開且探頭禁止對著人。
(3)使用拉曼光譜儀的時候盡量帶上防護眼鏡,無論是否佩戴防護眼鏡,禁止直視打開的拉曼探頭。
(4)操作GLA800-RAMAN軟件時不要太快和頻繁,如:掃描背景時,1-2秒后再點擊運行按鈕。
(5)如需在激光器常亮模式下進行自定義測量時,請固定探頭,以免發(fā)生意外,同時盡量避免激光器處于常亮的狀態(tài)。
拉曼光譜儀的使用及注意事項
(6)數(shù)據(jù)處理操作時,須著重指出的是,在驗證分析試樣的時間,也要激發(fā)接近含量的標鋼,以便證明儀器是在正常的工作。
數(shù)據(jù)的選擇和取舍要穩(wěn)重,要考慮多方面的因素,如鐵值的變化,其它元素的變化,插入鋁量,激發(fā)斑點、激發(fā)聲音等,有時需要重磨試樣分析驗證,有時候需要多次激發(fā)來驗證。
分析數(shù)據(jù),一律以標鋼含量為準,以控制標鋼的正負偏差為準。
每次新?lián)Q氬氣后,工作曲線必須重新標準化,當瓶內(nèi)壓力降到15個大氣壓時;
需要更換新氬氣;如果在工作過程中發(fā)現(xiàn)激發(fā)斑點呈白點狀,也應另換一瓶新氬氣。
(7)拉曼光譜儀使用完畢,蓋好拉曼探頭的保護蓋子,妥善放。
(8)拉曼光譜儀使用結(jié)束后,先關(guān)閉激光器,斷開光譜儀,關(guān)掉軟件,讓散熱風扇再吹1-2分鐘再關(guān)掉總電源。