安捷倫液相色譜儀的規(guī)范操作　　1. 目的：明確安捷倫液相色譜儀的規(guī)范操作，確保數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性?！　?. 范圍：適用于安捷倫液相色譜儀?！　?.職責(zé)：檢驗人員對此負(fù)責(zé)。　　4.操作規(guī)程：　　4.1系統(tǒng)組成　　本系統(tǒng)由1個溶劑二元輸送泵(分主/A泵和副/B泵)、手動進樣閥、柱溫箱、檢測器、化學(xué)工作站和電腦等組成?！　?.2安捷倫液相色譜儀準(zhǔn)備　　4.2.1使用前應(yīng)根據(jù)待檢樣品的檢驗方法準(zhǔn)備所需的流動相，用合適的0.45μm濾膜過濾，超聲脫氣20min?！　?.2.2 根據(jù)待檢樣品的需要更換合適的色譜柱(柱進出口位置應(yīng)與流動相流向一致)和定量環(huán)?！　?.2.3 配制樣品和標(biāo)準(zhǔn)溶液(也可在平衡系統(tǒng)時配制)，用合適的0.45μm濾膜過濾?！　?.2.4 檢查儀器各部件的電源線、數(shù)據(jù)線和輸液管道是否連接正?！　?.1 將待測樣品按要求前處理，準(zhǔn)備HPLC 所需流動相，檢查線路是否連接完好，廢液瓶是否夠用等?！　?.3安捷倫液相色譜儀開機：　　4.3.1 打開計算機,進入中文Windows XP畫面,并運行CAG Bootp Server程序?！　?.3.2打開 1200 LC 各模塊電源?！　?.3.3 待各模塊自檢完成后，雙擊[Instrument 1 Online]圖標(biāo)，化學(xué)工作站自動與1200LC　　通訊，進入的工作站畫面如下所示?！　?.3.4 從[視圖]菜單中選擇[方法和運行控制]畫面, 點擊[視圖]菜單中的[顯示頂部 工具欄]， [ 顯示狀態(tài)工具欄]，[系統(tǒng)視圖],[樣品視圖]，使其命令前有[√]標(biāo)志，來調(diào)用所需的界面?！　?.3.5把流動相放入溶劑瓶中?！　?.3.6打開沖洗閥?！　?.3.7點擊[泵]圖標(biāo)，點擊[設(shè)置泵…]選項，進入泵編輯畫面?！　?.3.8設(shè)流速：5ml/min，點擊[確定]?！　?.3.9 點擊[泵] 圖標(biāo)，點擊[控制…]選項，選中[啟動]，點擊[確定] ，則系統(tǒng)開始沖洗，直到管線內(nèi)(由溶劑瓶到泵入口)無氣泡為止,切換通道繼續(xù)沖洗，直到所有要用通道無氣泡為止?！　?.3.10 點擊[泵] 圖標(biāo)，點擊[控制…]選項，選中[關(guān)閉]，點擊[確定]關(guān)泵， 關(guān)閉沖洗閥?！　?.3.11 點擊[泵]圖標(biāo)，點擊 [設(shè)置泵…選項]，設(shè)流速：1.0ml/min?！　?.3.12 點擊泵下面的瓶圖標(biāo)，如下圖所示(以單元泵為例)，輸入溶劑的實際體積和瓶體積。 也可輸入停泵的體積，點擊[確定]?！　?.4安捷倫液相色譜儀的數(shù)據(jù)采集方法編輯　　4.4.1開始編輯完整方法：從[方法]菜單中選擇[編輯完整方法…] 項，如下圖所示選中除[數(shù)據(jù)分析 ]外的三項，點擊[確定]，進入下一畫面。 4.4.2方法信息　　4.4.2.1在[方法注釋]中加入方法的信息(如：測試方法)。 4.4.2.2 點擊 [確定]， 進入下一畫面。 4.4.3 泵參數(shù)設(shè)定　　4.4.3.1 在[流速]處輸入流量,如1ml/min，在[溶劑 B]處輸入80.0,(A=100-B) ,也可[插入 ]一行[時間表] ,編輯梯度。在[壓力限]處輸入柱子的zui大耐高壓，以保護柱子。　　4.4.3.2 點擊[確定]，進入下一畫面。　　4.4.4柱溫箱參數(shù)設(shè)定　　4.4.4.1 在[溫度]下面的空白方框內(nèi)輸入所需溫度,如：40度。并選中它,點擊[更多>>] 鍵,如圖所示,選中[與左側(cè)相同]，使柱溫箱的溫度左右一致。　　4.4.4.2點擊[確定]，進入下一畫面?！　?.4.5 檢測器參數(shù)設(shè)定：檢測波長：一般選擇zui大吸收處的波長。樣品帶寬：一般選擇zui大吸收值一半處的整個寬度。參比波長：一般選擇在靠近樣品信號的無吸收或低吸收區(qū)域 。參比帶寬：至少要與樣品信號的帶寬相等，許多情況下用100nm作為缺省值。同時可以輸入采集光譜方式，步長，范圍，閾值。選中所用的燈?！　?.4.6在[ 運行時選項表 ]中選中[ 數(shù)據(jù)采集]，點擊[確定]?！　?.4.7 點擊[方法]菜單，選中[方法另存為…]，輸入一方法名，如[測試]，點擊[確定]?！　?.4.8 從菜單 [視圖]中選中[在線信號],選中[信號窗口1],然后點擊[改變…] 鈕,將所要繪圖的信號移到右邊的框中,點擊[確定]。(如同時檢測二個信號,則重復(fù)10,選中[信號窗口2]?！　螕鬧改變]鍵，即可彈出右側(cè)的[編輯信號圖譜]窗口，進而選擇所需的譜圖信號。 4.4.9 從[運行控制]菜單中選擇[樣品信息]選項，如下圖所示，輸入操作者名稱，如[安裝工程師]；在[數(shù)據(jù)文件 ]中選擇[手動]或[前綴/計數(shù)器]。區(qū)別: 手動--每次做樣之前必須給出新名字,否則儀器會將上次的數(shù)據(jù)覆蓋掉。 Pr—在前綴/計數(shù)器----[前綴]框中輸入前綴，在[計數(shù)器]框中輸入計數(shù)器的起始位，儀器會自動命名，如vwd數(shù)據(jù)0001，vwd數(shù)據(jù)0002……。　　4.4.10 點擊[確定] ,從[儀器] 菜單選擇[系統(tǒng)開啟]?！　?.4.11 等儀器準(zhǔn)備好，基線平穩(wěn)，用試樣溶液清洗注射器，并排除氣泡后抽取適量?！　?.5安捷倫液相色譜儀的數(shù)據(jù)分析方法編輯:　　4.5.1 從[視圖]菜單中，點擊[數(shù)據(jù)分析]進入數(shù)據(jù)分析畫面?！　?.5.2 從[文件]菜單選擇[調(diào)用信號]，選中您的數(shù)據(jù)文件名，如下圖所示。點擊[ 確定]，則數(shù)據(jù)被調(diào)出?！　?.5.3做譜圖優(yōu)化：從[圖形]菜單中選擇[信號選項]，如下圖所示。從[范圍] 中選擇[滿量程] 或[自動量程] 及合適的時間范圍或選擇[自定義量程] 調(diào)整。反復(fù)進行，直到圖的比例合適為止。點擊[ 確定]?！　?.6安捷倫液相色譜儀積分:　　4.6.1 從[積分]菜單中選擇[積分事件]選項，如下圖所示。選擇合適的[斜率靈敏度]　　，[峰寬]，[zui小峰面積]，[zui小峰高]。 **液相色譜分析中基線很粗的話要考慮的方面 　　**液相色譜分析中基線很粗的話，需要考慮的方面較多，主要如下：

　　1、首先檢查**液相色譜儀的噪聲，如果噪聲大，會引起基線變粗，需要采取措施降低噪聲；如果基線粗是因為噪聲大引起，要解決這個問題就要看你的檢測器和工作站的指標(biāo)以及壓力是否平穩(wěn)，然后可以通過脫氣等一系列的方法降低噪聲。

　　2、調(diào)節(jié)你的電腦分辨率，如果分辨率太低，調(diào)節(jié)一下就會見效。

　　3、還可能是采樣頻率高。將檢測器的狹縫寬度設(shè)置得小一點，可能很快就能解決問題。

　　4、如果是工作站得坐標(biāo)太大，調(diào)節(jié)一下，將坐標(biāo)設(shè)置小點就可能解決問題。

　　5、有可能是光源用久了，能量不足引起，這樣的話應(yīng)該調(diào)換光源。

　　6、電源的紋波太大，也會引起基線變粗，這個問題很多科技工作者不大注意沒，所以還應(yīng)該仔細(xì)檢查光源的電路。

　　7、光路通道有污染或流動池污染。如果這樣，就要清洗光路通道中的光學(xué)組件，或者清洗流動池。

　　8、可流動相中有氣泡，應(yīng)認(rèn)真排氣。

　　9、如果確定不是色譜系統(tǒng)的原因，就可能是電源接地的問題，將檢測器外殼、接收裝置外殼和電腦的外殼等用電線連起來，認(rèn)真的接地。