【*** 使用手冊(cè)】紫外可見分光光度計(jì)是基于紫外可見分光光度法試驗(yàn)方法，利用物質(zhì)分子對(duì)紫外可見光譜區(qū)的輻射吸收來進(jìn)行分析的一種分析儀器，主要由光源、單色器、吸收池、檢測(cè)器和信號(hào)處理器等部件組成?！　》肿拥淖贤饪梢娢展庾V是由于分子中的某些基團(tuán)吸收了紫外可見輻射光后，發(fā)生了電子能級(jí)躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu)，其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同，因此，每種物質(zhì)就有其特有的、固定的吸收光譜曲線，可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測(cè)定該物質(zhì)的含量，這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)?！　∽贤饪梢姺止夤舛扔?jì)的類型很多，基本可以歸納為三種類型：單光束分光光度計(jì)、雙光束分光光度計(jì)和雙波長分光光度計(jì)?！　喂馐止夤舛扔?jì)　　其光路經(jīng)單色器分光后的一束平行光，輪流通過參比溶液和樣品溶掖，以進(jìn)行吸光度的測(cè)定。這種類型的分光光度計(jì)結(jié)構(gòu)簡單，操作方便，維修容易，適用于常規(guī)分析。國產(chǎn)722型，751型、724型、英國SP500型以及 BackmanDU-8型等均屬于此類光度計(jì)?！　‰p光束分光光度計(jì)　　其光路經(jīng)單色器分光后經(jīng)反射鏡(M1)分解為弧度相等的兩束光，一束通過參比池，另一束通過樣品池。光度計(jì)能自動(dòng)比較兩束光的強(qiáng)度，此比值即為試樣的透射比，經(jīng)對(duì)數(shù)變換將它轉(zhuǎn)換成吸光度并作為波長的函數(shù)記錄下來。雙光束分光光度計(jì)一般都能自動(dòng)記錄吸收光譜曲線。由于兩束光同時(shí)分別通過參比池和樣品他，還能自動(dòng)**光源強(qiáng)度變化所引起的誤差。這類儀器有國產(chǎn)710型、730型和740型，日立220系列，島津-210，英國UNICAMSP-700等等?！　‰p波長分光光度計(jì)　　其基本光路由同一光源發(fā)出的光被分成兩束，分別經(jīng)過兩個(gè)單色器，得到兩束不同波長的單色光;再利用切光器使兩束光以**的頻率交替照射同一吸收池，然后經(jīng)過光電倍增管和電子控制系統(tǒng)，zui后由顯示器顯示出兩個(gè)波長處的吸光度差值ΔA(ΔA=A1-A2)?！　‰p波長分光光度計(jì)的優(yōu)點(diǎn)在于，對(duì)于多組分混合物、混濁試樣(如生物組織液)的分析，以及存在背景于擾或共存組分吸收干擾的情況下，利用雙波長分光光度法，往往能提高方法的靈敏度和選擇性。利用雙波長分光光度計(jì)，能獲得導(dǎo)數(shù)光譜。通過光學(xué)系統(tǒng)轉(zhuǎn)換，使雙波長分光光度計(jì)能很方便地轉(zhuǎn)化為單波長工作方式。如果能在兩波長處分別記錄吸光度隨時(shí)間變化的曲線，還能進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究。 紫外可見分光光度計(jì)使用說明

紫外可見分光光度計(jì)來自于美國，產(chǎn)品包含光源，單色器，吸收池，檢測(cè)器和顯 示器等，它是一款對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性，定量以及結(jié)構(gòu)分析的儀器。這款儀器和人們常 用的可見光光度計(jì)有有很大的區(qū)別，除了波長范圍，使用光源都不一樣等，價(jià)格也 是后者要要貴一些；平時(shí)的使用和注意事項(xiàng)不一樣的，今天就先來學(xué)習(xí)一下紫外可見分光光度計(jì)使用方法： 1.試驗(yàn)中所用的量瓶、移液管均應(yīng)經(jīng)檢定校正、洗凈后使用。 2.使用的石英吸收池必須潔凈。用于盛裝樣品、參比及空內(nèi)溶液的吸收池，當(dāng)裝 入同一溶劑時(shí)，在規(guī)定波長測(cè)定吸收池的透光率，如透光率相差在0.3%以下者可配 對(duì)使用，否則必須加以校正。 3.取吸收池時(shí)，手指拿毛玻璃面的兩側(cè)。裝盛樣品溶液以池休積的4/5為度，使用 揮發(fā)性溶液吋應(yīng)加蓋，透光面要用擦鏡紙由上而下擦拭干凈，檢視應(yīng)無殘留溶劑。 為防止溶劑揮發(fā)后溶質(zhì)殘留在池子的透光面，可先用蘸有空白溶劑的擦鏡紙擦拭， 然后再用干擦鏡紙拭凈。吸收池放入樣品室時(shí)應(yīng)注意每次放入方向相同。使用后用 洗液及水沖洗干凈，晾干防塵保存，吸收池發(fā)現(xiàn)污染不易洗凈時(shí)可用硫酸發(fā)煙硝酸(3 ：1V/V)混合液稍加浸泡后，洗凈備用。如用重鉻酸鉀清潔液清洗時(shí)，吸收池不貧在 清潔液中長時(shí)間浸泡，否則清潔液中的重鉻酸鉀結(jié)晶會(huì)損壞吸收池的光學(xué)表面，并 應(yīng)充分甩水沖洗，以防重鉻酸鉀吸附于吸收池表面。 4.測(cè)定前應(yīng)先檢查所用的溶劑在測(cè)定供試品所用的波長附近是否符合要求，可用 lcm石英吸收池盛溶劑以空氣為空白（即參比光路中不放置**物質(zhì))測(cè)定其吸收度 ，應(yīng)符合規(guī)定。 5.稱量應(yīng)按藥典規(guī)定要求。配制測(cè)定溶液時(shí)稀釋轉(zhuǎn)移次數(shù)應(yīng)盡可能少，轉(zhuǎn)移稀釋 時(shí)所取容積一般應(yīng)不少于5cm。含量測(cè)定供試品應(yīng)稱取2份，如為對(duì)照品比較法，對(duì) 照品一般也應(yīng)稱取2份。吸收系數(shù)檢查也應(yīng)稱取供試品2份，平行操作，每份結(jié)果對(duì) 平均值的偏差應(yīng)在±0.5%以內(nèi)。作鑒別或檢查可取樣品1份。 6.供試品測(cè)定溶液的濃度，除各該品種項(xiàng)下已有注明者外，供試品溶液的吸收度 以在0.3~0.7之間為宜，吸收度讀數(shù)在此范圍誤差較小，并應(yīng)結(jié)合所用儀器吸收度線 性范圍，配制合適的讀數(shù)濃度。 7.選用儀器的狹縫譜帶寬度應(yīng)小于供試品吸收帶的半寬度，否則測(cè)得的吸收度值 會(huì)偏低，狹縫寬度的選擇應(yīng)以減小狹縫寬度吋供試品的吸收度不揮增加為準(zhǔn)，對(duì)于 紫外測(cè)定的部分品種，可以使用2nm縫寬，但對(duì)某些品種如青霉素鉀及鈉的吸收度 檢查則需用lnm縫寬或更窄，否則其264nm的吸收度會(huì)偏低。 8.測(cè)定時(shí)除另有規(guī)定者外，應(yīng)在規(guī)定的吸收峰±2nm處，再測(cè)幾點(diǎn)的吸收度，以核 對(duì)供試品的吸收峰位置是否正確，并以吸收度**的波長作為測(cè)定波長，除另有規(guī) 定外吸收度**波長應(yīng)在該品種項(xiàng)下規(guī)定的波長±lnm以內(nèi)，否則應(yīng)考慮試樣的同一 性、純度以及儀器波長的準(zhǔn)確度 9.除另有規(guī)定外，比色法所用的空內(nèi)系指用同休積的溶劑代替對(duì)照品或供試品溶 液，然后依次加入等量的相應(yīng)試劑，并用同樣方法處理。 10.當(dāng)吸收度和濃度關(guān)系不呈線性關(guān)系時(shí)，應(yīng)取數(shù)份梯度量的對(duì)照濃度，用溶劑補(bǔ) 充至同一休積，顯色后測(cè)定各份溶液的吸收度，然后以吸收度與相應(yīng)的濃度繪制標(biāo) 準(zhǔn)曲線，再根據(jù)供試品的吸收度在標(biāo)準(zhǔn)曲線上求出其含量。