檢測器的作用是將柱流出物中樣品組成和含量的變化轉(zhuǎn)化為可供檢測的信號(hào)，常用檢測器有紫外吸收、熒光、示差折光、化學(xué)發(fā)光等?！? 　 1. 紫外可見吸收檢測器（ultraviolet－visible detector，UVD） 　紫外可見吸收檢測器（UVD）是HPLC中應(yīng)用***廣泛的檢測器之一，幾乎所有的液相色譜儀都配有這種檢測器。其特點(diǎn)是靈敏度較高，線性范圍寬，噪聲低，適用于梯度洗脫，對(duì)強(qiáng)吸收物質(zhì)檢測限可達(dá)1ng，檢測后不破壞樣品，可用于制備，并能與**檢測器串聯(lián)使用。紫外可見檢測器的工作試驗(yàn)方法與結(jié)構(gòu)同一般分光光度計(jì)相似，實(shí)際上就是裝有流動(dòng)地的紫外可見光度計(jì)。 　　（1）紫外吸收檢測器　 紫外吸收檢測器常用氘燈作光源，氘燈則發(fā)射出紫外-可見區(qū)范圍的連續(xù)波長，并安裝一個(gè)光柵型單色器，其波長選擇范圍寬（190nm～800nm）。它有兩個(gè)流通池，一個(gè)作參比，一個(gè)作測量用，光源發(fā)出的紫外光照射到流通池上，若兩流通池都通過純的均勻溶劑，則它們在紫外波長下幾乎無吸收，光電管上接受到的輻射強(qiáng)度相等，無信號(hào)輸出。當(dāng)組分進(jìn)入測量池時(shí)，吸收**的紫外光，使兩光電管接受到的輻射強(qiáng)度不等，這時(shí)有信號(hào)輸出，輸出信號(hào)大小與組分濃度有關(guān)。 局限：流動(dòng)相的選擇受到**限制，即具有**紫外吸收的溶劑不能做流動(dòng)相，每種溶劑都有截止波長，當(dāng)小于該截止波長的紫外光通過溶劑時(shí)，溶劑的透光率降至10%以下，因此，紫外吸收檢測器的工作波長不能小于溶劑的截止波長。 　?。?）光電二極管陣列檢測器（photodiode array detector， PDAD） 　也稱快速掃描紫外可見分光檢測器，是一種新型的光吸收式檢測器。它采用光電二極管陣列作為檢測元件，構(gòu)成多通道并行工作，同時(shí)檢測由光柵分光，再入射到陣列式接收器上的**波長的光信號(hào)，然后對(duì)二極管陣列快速掃描采集數(shù)據(jù)，得到吸收值(A)是保留時(shí)間(tR)和波長(l)函數(shù)的三維色譜光譜圖。由此可及時(shí)觀察與每一組分的色譜圖相應(yīng)的光譜數(shù)據(jù)，從而迅速?zèng)Q定具有***佳選擇性和靈敏度的波長。 　單光束二極管陣列檢測器，光源發(fā)出的光先通過檢測池，透射光由全息光柵色散成多色光，射到陣列元件上，使所有波長的光在接收器上同時(shí)被檢測。陣列式接收器上的光信號(hào)用電子學(xué)的方法快速掃描提取出來，每幅圖象僅需要10ms，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過色譜流出峰的速度，因此可隨峰掃描。 　　 2．熒光檢測器（fluorescence detector， FD） 　熒光檢測器是一種高靈敏度、有選擇性的檢測器，可檢測能產(chǎn)生熒光的化合物。某些不發(fā)熒光的物質(zhì)可通過化學(xué)衍生化生成熒光衍生物，再進(jìn)行熒光檢測。其***小檢測濃度可達(dá)0.1ng／ml，適用于痕量分析；一般情況下熒光檢測器的靈敏度比紫外檢測器約高2個(gè)數(shù)量級(jí)，但其線性范圍不如紫外檢測器寬。　　近年來，采用激光作為熒光檢測器的光源而產(chǎn)生的激光誘導(dǎo)熒光檢測器**地增強(qiáng)了熒光檢測的信噪比，因而具有很高的靈敏度，在痕量和超痕量分析中得到廣泛應(yīng)用。 　　 3. 示差折光檢測器（differential refractive Index detector， RID） 　示差折光檢測器是一種濃度型通用檢測器，對(duì)所有溶質(zhì)都有響應(yīng)，某些不能用選擇性檢測器檢測的組分，如高分子化合物、糖類、脂肪烷烴等，可用示差檢測器檢測。示差檢測器是基于連續(xù)測定樣品流路和參比流路之間折射率的變化來測定樣品含量的。光從一種介質(zhì)進(jìn)入另一種介質(zhì)時(shí)，由于兩種物質(zhì)的折射率不同就會(huì)產(chǎn)生折射。只要樣品組分與流動(dòng)相的折光指數(shù)不同，就可被檢測，二者相差愈大，靈敏度愈高，在**濃度范圍內(nèi)檢測器的輸出與溶質(zhì)濃度成正比。 4. 電化學(xué)檢測器 （elec）chemical detector， ED） 　電化學(xué)檢測器主要有安培、極譜、庫侖、電位、電導(dǎo)等檢測器，屬選擇性檢測器，可檢測具有電活性的化合物。目前它已在各種無機(jī)和有機(jī)陰陽離子、生物組織和體液的代謝物、食品添加劑、環(huán)境污染物、生化制品、農(nóng)藥及醫(yī)藥等的測定中獲得了廣泛的應(yīng)用。其中，電導(dǎo)檢測器在離子色譜中應(yīng)用***多。 　　電化學(xué)檢測器的優(yōu)點(diǎn)是：　 　 ①靈敏度高，***小檢測量～般為ng級(jí)，有目可達(dá)pg級(jí)； 　　 ②選擇性好，可測定大量非電活性物質(zhì)中極痕量的電活性物質(zhì)； 　 ③線性范圍寬，一般為4～5個(gè)數(shù)量級(jí)； 　　 ④設(shè)備簡單，成本較低； ⑤易于自動(dòng)操作。 　　 5. 化學(xué)發(fā)光檢測器 （c。iluminescence detector， CD） 　化學(xué)發(fā)光檢測器是近年來發(fā)展起來的一種快速、靈敏的新型檢測器，因其設(shè)備簡單、價(jià)廉、線性范圍寬等優(yōu)點(diǎn)。其試驗(yàn)方法是基于某些物質(zhì)在常溫下進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)，生成處于激發(fā)態(tài)勢反應(yīng)中間體或反應(yīng)產(chǎn)物，當(dāng)它們從激發(fā)態(tài)返回基態(tài)時(shí)，就發(fā)射出光子。由于物質(zhì)激發(fā)態(tài)的能量是來自化學(xué)反應(yīng)，故叫作化學(xué)發(fā)光。當(dāng)分離組分從色譜柱中洗脫出來后，立即與適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)發(fā)光試劑混合，引起化學(xué)反應(yīng)，導(dǎo)致發(fā)光物質(zhì)產(chǎn)生輻射，其光強(qiáng)度與該物質(zhì)的濃度成正比。 　這種檢測器不需要光源，也不需要復(fù)雜的光學(xué)系統(tǒng)，只要有恒流泵，將化學(xué)發(fā)光試劑以**的流速泵入混合器中，使之與柱流出物迅速而又均勻地混合產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光，通過光電倍增管將光信號(hào)變成電信號(hào)，就可進(jìn)行檢測。這種檢測器的***小檢出量可達(dá)10-12g。

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相關(guān)熱詞：

等離子清洗機(jī),反應(yīng)釜,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,高精度溫濕度計(jì),露點(diǎn)儀,**液相色譜儀價(jià)格,霉菌試驗(yàn)箱,跌落試驗(yàn)臺(tái),離子色譜儀價(jià)格,噪聲計(jì),高壓**器,集菌儀,接地電阻測試儀型號(hào),柱溫箱,旋渦混合儀,電熱套,場強(qiáng)儀**材料試驗(yàn)機(jī)價(jià)格,洗瓶機(jī),勻漿機(jī),耐候試驗(yàn)箱,熔融指數(shù)儀,透射電子顯微鏡。

日常維護(hù)和保養(yǎng) 貯液器：清潔是保持流動(dòng)相貯液器正常使用的關(guān)鍵，要盡可能使用HPLC級(jí)的溶劑和試劑含有緩沖鹽和非HPLC級(jí)的流動(dòng)相**要通過0.5μm的過濾器以除去其中的微粒物質(zhì)。改變流動(dòng)相時(shí)應(yīng)防止交叉污染，陳舊的流動(dòng)相和用久了的試劑瓶應(yīng)定期廢棄，防止生長微生物和組分改變。貯器內(nèi)壁定期清洗，里面的附件要經(jīng)常更換。

泵：泵的密封圈是***易磨損的部件，密封墊圈的損壞可引起系統(tǒng)的許多故障。有人建議3個(gè)月?lián)Q一次墊圈。但也不能一概而論，要看墊圈的材料質(zhì)量，使用壓力大小、保養(yǎng)以及緩沖液的情況而定。采取下列措施可以延長墊圈的壽命：

1 每天要把泵中的緩沖液體洗干凈，防止鹽沉積，泵要浸在無緩沖液的溶液或有機(jī)溶劑中；

2 用HPLC級(jí)試劑；

3 用燒結(jié)不銹鋼沉子。要注意防止因泵阻塞造成壓力過高而損壞柱塞桿或燒壞電機(jī)。

進(jìn)樣器：停機(jī)后要用溶劑沖洗干凈進(jìn)樣器內(nèi)殘留的樣品和緩沖鹽，防止無機(jī)鹽沉積和樣品微粒造成閥轉(zhuǎn)子面磨損或阻塞，嚴(yán)禁用氣相色譜那樣的尖針頭進(jìn)樣。

色譜柱：防止柱性能下降有以下幾方面的措施：

1 溶劑的化學(xué)腐蝕不能太強(qiáng)；

2 避免微粒在柱頭沉降；

3 泵上要裝壓力限制器，防止壓力過高沖擊大；

4 流動(dòng)相PH>7時(shí)用大粒度同種填料作預(yù)柱；

5 柱頭加燒結(jié)片不銹鋼濾片，需要時(shí)加保護(hù)柱；

檢測器：要保持檢測器清潔，每天用后連同色譜柱柱一起沖洗。提倡不定期用強(qiáng)溶劑反向沖洗檢測池（拆開柱）。用脫過氣的流動(dòng)相，防止空氣泡卡在池內(nèi)。檢測器燈有**的壽命，不用時(shí)不要打開燈。

操作極限：每臺(tái)泵都有壓力上限，系統(tǒng)達(dá)到預(yù)定值時(shí)會(huì)自動(dòng)停泵，這樣能保護(hù)柱和其他硬件。上限壓力設(shè)在20MPa以下，泵墊圈和進(jìn)樣閥耐用，但壓力上限設(shè)定過低會(huì)延長分析時(shí)間。根據(jù)檢驗(yàn)設(shè)定壓力上限在15～20MPa為宜。新柱的壓力比較低，隨著使用時(shí)間加長而壓力上升，所以設(shè)定的壓力上限也應(yīng)變化。在梯度洗脫中應(yīng)考慮因流動(dòng)相的變化而引起的壓力變化，避免上限壓力過低造成中途停泵。帶有微機(jī)的系統(tǒng)還需設(shè)定壓力下限，一般在0.5～1MPa，在貯器中流動(dòng)相被抽干或嚴(yán)重滲漏時(shí)會(huì)自動(dòng)停泵。有時(shí)下限壓力設(shè)在0也會(huì)自動(dòng)停泵。

液相色譜速率理論方程式

　　在范第姆特方程模型基礎(chǔ)上，根據(jù)液相色譜的特點(diǎn)作了某些修正，得到如下幾種液相色譜速率理論方程式?！　?、**液相色譜速率理論方程式：

　　其中渦流擴(kuò)散項(xiàng)：

　　分子擴(kuò)散項(xiàng)：

　　傳質(zhì)阻力項(xiàng)：

　　其中包括：稱為流動(dòng)的流動(dòng)相中傳質(zhì)阻力系數(shù)，稱為滯留的流動(dòng)相中的傳質(zhì)阻力系數(shù)，稱為固定相中的傳質(zhì)阻力系數(shù)?！　?*液相色譜速率理論方程詳細(xì)表達(dá)式：

　　式中，　　d_p——色譜柱填料平均粒徑；　　d_f——固定相有效液膜厚度；　　U——流動(dòng)相平均流速；　　D_m——組分分子在流動(dòng)相中的擴(kuò)散系數(shù)；　　D_s——組分分子在固定相中的擴(kuò)散系數(shù)；　　w_m——由色譜柱和填充的性質(zhì)所決定的系數(shù)；　　w_s——與容量因子k有關(guān)的系數(shù)；　　w_sm——與顆粒微孔中被流動(dòng)相所占據(jù)部分的分?jǐn)?shù)以及容量因子k有關(guān)的系數(shù)。其余符號(hào)含義同前面?！　纳鲜街锌梢钥闯?，液相色譜和氣象色譜的速率方程式基本一致，主要區(qū)別在于液相色譜中影響柱效的主要因素是傳質(zhì)阻力項(xiàng)，而份子擴(kuò)散項(xiàng)對(duì)柱效的影響不像氣相色譜那樣明顯。

　　2.吉丁斯修正速率理論方程式：　　吉丁斯認(rèn)為流動(dòng)相流速對(duì)渦流擴(kuò)散項(xiàng)影響較大，對(duì)范第姆特方程修正如下：

　　式中為渦流擴(kuò)散項(xiàng)，相當(dāng)于上式的含義。