【導(dǎo)讀】等電聚焦電泳色譜儀是利用蛋白質(zhì)分子或其它兩性分子的等電點不同，在一個穩(wěn)定、連續(xù)和線性的pH梯度中進行分離，檢測方法有染色法、掃描法和其它檢測方法。一、染

等電聚焦電泳色譜儀是利用蛋白質(zhì)分子或其它兩性分子的等電點不同，在一個穩(wěn)定、連續(xù)和線性的pH梯度中進行分離，檢測方法有染色法、掃描法和其它檢測方法。

一、染色法：

1、考馬斯亮藍染色法。

2、銀染色法。

3、同工酶染色法。

4、專一蛋白染色法。

5、熒光標(biāo)記以及免疫法。

二、掃描法：

激光光源強度大，單色性好，掃描IEFE區(qū)帶***合適。

操作程序和條件必須嚴(yán)格相同。

三、其它檢測方法：

1、電泳轉(zhuǎn)移法。

2、雙向電泳法。

3、滴定曲線分析法。

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相關(guān)熱詞：

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　　【***** 維修保養(yǎng)】長假歸來，不僅人員忙碌起來，實驗室中zui常用的色譜儀器也要進入高強度的工作狀態(tài)，在長假開始之時您是否做好了關(guān)機前的維護保養(yǎng)呢？如果沒有按照規(guī)范做好長假前的關(guān)機維護，就可能會導(dǎo)致儀器在節(jié)后伊始出現(xiàn)“長假綜合癥”。做好了這些節(jié)前的維護工作，我們在節(jié)后將會省去許多煩心事，但是對于色譜儀，我們?nèi)匀灰凑找韵乱髞磉M行節(jié)后的儀器開機?！　∫合嗌V儀　　開機順序：　　1.檢查溶劑托盤托盤上的溶劑是否足量，以溶劑液面超過過輸液管過濾頭5厘米以上為宜。　　2.檢查輸液管內(nèi)部有否氣泡，若有，應(yīng)及時通過排液閥排出。　　3.對溶劑(針對**項看是否需要補充溶劑)和樣品進行處理，過濾，脫氣。　　4.打開主機電源，依次打開檢測器，泵A，泵B，柱箱的電源?！　?.打開電腦，開啟色譜工作站?！　?.先在工作站中開啟活塞泵，以所需的流動相平衡系統(tǒng)(約需30min)。　　7.打開氘燈，等待系統(tǒng)基線走穩(wěn)，開始進樣檢測。　　離子色譜儀　　開機順序：　　1、打開氮氣總閥，將分壓調(diào)至0.2Mpa，再調(diào)節(jié)離子色譜儀上的減壓表指針為3~6 psi。　　2、打開儀器電源?！　?、打開AS-DV或AS-AP電源?！　?、開啟電腦，啟動儀器控制器?！　?、雙擊桌面上的變色龍圖標(biāo)進入軟件?！　?、確認(rèn)儀器聯(lián)機狀態(tài)是否正常。　　氣相色譜儀　　開機順序：　　1、開機前要先打開載氣、氦氣、空氣總閥的開關(guān)，檢查二次表的壓力一般都在0.6MPa(氦氣在0.2MPa)?！　?、儀器電源開啟后要先通過自檢再打開工作站，確認(rèn)每根柱子都要有流量之后再升溫做樣。　　3、氣密性檢查，如果氣路泄露，會導(dǎo)致儀器工作不穩(wěn)定或靈敏度下降甚至可能發(fā)生爆炸?！　?、檢測器：FID和TCD的檢測，溫度要控制在室溫10℃到339℃，控溫溫度在±0.1℃。　　5、在主機控制面板上設(shè)定檢測器溫度、汽化室溫度、柱箱溫度，被測物各組分沸點范圍較寬時，還需設(shè)定程序升溫速率，確認(rèn)無誤后保存參數(shù)，開始升溫?！　?、打開氫氣發(fā)生器和純凈空氣泵的閥門，氫氣壓力調(diào)至0.3~0.4Mpa，空氣壓力調(diào)至0.3~0.5Mpa，在主機氣體流量控制面板上調(diào)節(jié)氣體流量至實驗要求；當(dāng)檢測器溫度大于100℃時，按《點火》按鈕點火，并檢查點火是否成功，點火成功后，待基線走穩(wěn)，即可進樣?！　〔煌瑑x器有不同的開機注意事項，長假歸來的實驗室工作人員**要詳細了解之后再去為色譜儀開機，不過相信在看過這篇文章之后，您將對如何為色譜儀開機有了直觀的了解。

我們不應(yīng)該在儀器有故障反映時才想到應(yīng)該對儀器進行維護，不僅要定期有目的地做，還要樹立一個觀念 ， 維護與保養(yǎng)的一個重要作用就是保障保證一個良好的檢測狀態(tài)，確保得到準(zhǔn)確的檢測數(shù)據(jù) ， 影響分析儀器的可持續(xù)運行有因素主要有：

　　1.易損件清理更換不及時;

　　2.硬件使用不科學(xué);

　　3.儀器本身選購及配置不當(dāng);

　　各種分析儀器從結(jié)構(gòu)、功能、應(yīng)用各方面差別**，但是經(jīng)常出的問題以及維護保養(yǎng)的方向還是有**的共性。這種共性就是：“儀器本身各個固定部件很少出問題，只有使用者經(jīng)常接觸到的地方才容易出故障”。

　　下面分別就氣相色譜儀的常見故障及常用維護：

安捷倫氣相色譜儀7890B

　　部分：氣相色譜儀

　　在使用氣相色譜儀時(以下主要以配有分流進樣口和氫火焰檢測器的氣相色譜儀為例)，使用者經(jīng)常做的對儀器結(jié)構(gòu)有改變的行為莫過于換柱了，雖然換柱和扎針一樣，都是氣相色譜工作者的基本功，但是，至少有一半的問題與之相關(guān)。

　　問題1：漏氣

　　進樣墊漏氣，接柱的固定螺絲漏氣，尤其是使用填充柱而又采用硅石墨墊更會如此。如果用橡膠圈好些，但是不需用，需要定期更換。毛細柱由于采用石墨墊圈則漏氣問題相對好些。

　　問題2：固定位置不準(zhǔn)：

　　這是制約靈敏度的一個關(guān)鍵點。填充柱由于是剛性的，尺寸形狀固定，在換裝時，一般容易掌握。常出問題的是毛細柱，由于其本身柔性，在進樣口和檢測器內(nèi)的長度**由使用者個人掌握，如果把握不準(zhǔn)，會成為制約實驗效果的一個重要因素。不同公司儀器的裝柱尺寸是不同的，在使用不同襯管時也有很大區(qū)別。有些儀器提供了專用的測量工具，有些則沒有。

　　問題3：清理更換不及時：

　　這是硬件無故障而檢測狀態(tài)不好的主要原因，其具體表現(xiàn)就是污染，如，進樣口襯管及玻璃棉污染，柱內(nèi)污染，檢測器污染，如果不及時更換或清洗，會造成基線不穩(wěn)，靈敏度下降等現(xiàn)象。

　　氣相色譜儀維修對策：

　　定期清洗，定期更換，用檢漏液測漏，是常用但不是的處理方法。我覺得，的方法是狀態(tài)監(jiān)控，時刻觀察系統(tǒng)狀態(tài)，發(fā)現(xiàn)問題馬上判斷問題再處理問題。同一臺機，同一根柱，在同流量，同柱頭壓下，應(yīng)該有基本一致的信號基線和差不多的穩(wěn)定時間，儀器狀態(tài)的不同問題會有各種不同的反映。

　　例 1 ： 裝柱后，通上**的流量，柱頭壓和平時不一樣。如果柱頭壓明顯比平時高，可能是柱頭堵塞。如果低，可能是漏氣或柱斷裂，漏氣可以在關(guān)閉柱箱風(fēng)扇后應(yīng)該能聽到聲音，柱斷裂可以很容易看出來。

　　例 2： 流量正常，柱頭壓正常，但基線信號明顯地低且穩(wěn)定奇快。這種現(xiàn)象在使用毛細柱時常發(fā)生，原因多半就是噴嘴堵塞。確定是否這個原因的方法就是進空白溶劑，如果信號比平時低了很多，而且出峰時間又晚了一些，就基本就是這個原因，這時只能關(guān)機清洗。

　　例 3 ： 流量正常，柱頭壓正常，在三溫(OVEN，INJ，DET)到達設(shè)定值后，但基線信號明顯地偏高且不穩(wěn)定。這種情況多是污染。污染又分：進樣口污染，柱污染，檢測器污染。確定是哪一種故障并不容易(有時還是交叉反應(yīng))，但是處理方法卻一致：停機-清洗-升溫烤。我建議每次清洗把檢測器和進樣口都處理一下，畢竟耗時間的是降溫升溫。