?一、凝膠成像系統(tǒng)的試驗(yàn)方法?

　　樣品在電泳凝膠或者其他載體上的遷移率不一樣，以標(biāo)準(zhǔn)品或者其他的替代標(biāo)準(zhǔn)品相比較就會(huì)對(duì)未知樣品作一個(gè)定性分析。這個(gè)就是圖像分析系統(tǒng)定性的基礎(chǔ)。根據(jù)未知樣品在圖譜中的位置可以對(duì)其作定性分析，就可以確定它的成份和性質(zhì)。

　　樣品對(duì)投射或者反射光有部分的吸收，從而照相所得到的圖像上面的樣品條帶的光密度就會(huì)有差異。光密度于樣品的濃度或者質(zhì)量成線性關(guān)系。根據(jù)未知樣品的光密度，通過(guò)于已知濃度的樣品條帶的光密度指相比較就可以得到未知樣品的濃度或者質(zhì)量。這就是圖像分析系統(tǒng)定量的基礎(chǔ)。采用***新技術(shù)的紫外透射光源和白光透射光源使光的分布更加均勻，**限度的**了光密度不均造成的對(duì)結(jié)果的影響。

　　二、凝膠成像的適用范圍?

　　1.蛋白質(zhì)、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分離純化結(jié)果作定性分析。

　　2.可以確定生物分子的分子量。

　　3.可以應(yīng)用于生物分子的定量分析中。

　　三、凝膠成像一般操作步驟?

　　1.打開(kāi)凝膠成像系統(tǒng)開(kāi)關(guān)。

　　2.打開(kāi)電腦，系統(tǒng)自動(dòng)打開(kāi)并進(jìn)入成像軟件。

　　3.打開(kāi)凝膠成像系統(tǒng)前面板，選擇使用紫外透射光源或者白光透射光源，將相應(yīng)光源安放到位。

　　4.將樣品放置在透射光源的樣品臺(tái)上。

　　5.在成像操作界面里面選擇使用Upperwhite光源，點(diǎn)擊綠色(即時(shí)成像)按鈕。

　　四、是不是像素越高，產(chǎn)品就越好?

　　像素是要針對(duì)成像設(shè)備來(lái)看的，比如數(shù)碼相機(jī)與CCD的像素就不具備可比性，其次CCD本身的質(zhì)量比單純的像素高低更重要。對(duì)于同級(jí)別CCD***重要的指標(biāo)是其大小，也就是CCD尺寸，尺寸越大其本身價(jià)值就成幾何倍地增長(zhǎng)。

　　五、配件紫外反射燈源的主要用途為何?

　　紫外反射燈源使用并不廣泛，主要是提供非透明材質(zhì)的DNA跑膠載體如紙層析等的成像需要而使用。由于比較常用的還是透明的瓊脂糖凝膠與聚丙烯酰胺凝膠，透射光源**可以滿足，因此將紫外反射光源作為選配件不列入標(biāo)配中。

　　六、為何要采用自動(dòng)變焦鏡頭，有何意義?

　　自動(dòng)變焦鏡頭無(wú)需手動(dòng)調(diào)節(jié)，可操作性強(qiáng)，同時(shí)也減少了EB潛在的污染機(jī)會(huì)。再者使得將CCD內(nèi)置成為了可能，從而達(dá)到防灰防塵防震的目的，更好地保護(hù)了核心部件延長(zhǎng)產(chǎn)品的使用壽命。

　　七、如何看待CCD的一些主要技術(shù)參數(shù)?

　　CCD的主要技術(shù)參數(shù)有CCD尺寸，有效像素，信噪比，采集位數(shù)等。其中CCD尺寸與信噪比都是影響成像的關(guān)鍵因素，尺寸越大能接受的信號(hào)就越多。而熱噪音越低，信噪比就越高，成像質(zhì)量也就越好。采集位數(shù)指色彩灰度的表達(dá)范圍。如采集位數(shù)為8則表示有2的8次方數(shù)量的灰度來(lái)還原色彩。

　　八、紫外對(duì)人體有傷害，是否具有防護(hù)措施?

　　紫外對(duì)人體，特別是眼睛有**傷害，TOCAN凝膠成像系統(tǒng)具備紫外防護(hù)設(shè)施，在紫外燈開(kāi)啟的狀態(tài)下，如不慎打開(kāi)暗箱，紫外燈會(huì)自動(dòng)熄滅防止對(duì)人體的傷害。

　　九、能否在凝膠成像上直接切膠?

　　TOCAN凝膠成像可以，如需直接切膠，首先按系統(tǒng)中間的觀察窗，打開(kāi)裝有進(jìn)口防紫外玻璃的觀察窗口，然后打開(kāi)左右兩側(cè)專(zhuān)為割膠所設(shè)計(jì)的小門(mén)，即可進(jìn)行切膠操作。

　　10、如何調(diào)節(jié)焦距 聚焦 光圈以獲得高質(zhì)量的圖片?

　　三個(gè)***重要的可調(diào)參數(shù)分別是焦距聚焦和光圈。其中焦距調(diào)節(jié)清晰度，聚焦調(diào)節(jié)圖像大小，光圈調(diào)節(jié)明暗。一般先把光圈調(diào)節(jié)到適宜的亮度后，再調(diào)節(jié)聚焦將圖像放到**，***后調(diào)解焦距，在圖像較大的情況下焦距比較容易調(diào)節(jié)到***清晰狀態(tài)，然后再把圖像縮放在適宜大小后成像即可。

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凝膠成像系統(tǒng)可以用于蛋白質(zhì)、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分離純化結(jié)果作定性分析。

（1）分子量定量

對(duì)于一般常用的DNA膠片,利用分子量定量功能,通過(guò)對(duì)膠上DNA Marker條帶的已知分子量注釋,自動(dòng)生成擬合曲線,并以它衡量得到未知條帶的分子量。通過(guò)這種方法所得到的結(jié)果較肉眼觀察估計(jì)要準(zhǔn)確很多。

（2）密度定量

一般常用的測(cè)定DNA(脫氧核糖核酸)和RNA(核糖核酸)濃度的方法是紫外吸收法,但它只能測(cè)定樣品中的總核苷酸濃度,而不能區(qū)分各個(gè)長(zhǎng)度片段的濃度。

利用凝膠成像系統(tǒng)和軟件,先將DNA膠片上某一已知其DNA含量的標(biāo)準(zhǔn)條帶進(jìn)行密度標(biāo)定以后,可以方便的單擊其他未知條帶，根據(jù)與已知條帶的密度做比較，可以得到未知DNA的含量。此方法也適用于對(duì)PAGE蛋白膠條帶的濃度測(cè)定。

（3）PCR定量

PCR定量主要是指，如果PCR實(shí)驗(yàn)擴(kuò)增出來(lái)的條帶不是一條，那么可以利用軟件計(jì)算出各個(gè)條帶占總體條帶的相對(duì)百分?jǐn)?shù)。

就此功能而言，與密度掃描類(lèi)似，但實(shí)際在試驗(yàn)方法上并不相同。PCR定量是對(duì)選定的幾條帶進(jìn)行相對(duì)密度定量并計(jì)算其占總和的百分?jǐn)?shù)，密度掃描時(shí)并對(duì)選擇區(qū)域生成縱向掃描曲線圖并積分。

（4）密度掃描

在分子生物學(xué)和生物工程研究中,***常用到的是對(duì)蛋白表達(dá)產(chǎn)物占整個(gè)菌體蛋白的百分含量的計(jì)算。

傳統(tǒng)的方法是利用專(zhuān)用的密度掃描,但利用生物分析軟件結(jié)合現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)室常規(guī)配備的掃描儀或者直接用白光照射的凝膠成像就能完成此項(xiàng)工作。